Innhold
Mikrobiologer studerer egenskapene til mikroorganismer, som alger, bakterier, protozoer, sopp og virus, ved hjelp av et mikroskop. Selv om noen organismer, som protozoer og gjærceller, er lette å se gjennom lysbilder, krever bakterieceller farging. Forskere har utviklet flere metoder, for eksempel Gram-fargeteknikken, syreresistent farging og fluorescerende farging for å forbedre visualiseringen av bakterieceller og cellestrukturer. Ved å bruke slike fargemetoder er det mulig å identifisere de strukturelle egenskapene som hjelper til med å klassifisere bakterier.
Bedre visning
Bakterieorganismer er så små at de fleste av dem bare er synlige under mikroskopet med en forstørrelseseffekt på 1000 ganger. Imidlertid gir den enkle økningen i størrelse ikke tilstrekkelig grad av klarhet, så bakteriene må derfor farges før observasjon for å gi klarheten som er nødvendig for visualisering.
Identifikasjon og klassifisering
Farging av bakterier for å skille mellom typer bakterier er kjent som differensiell farging. Gram flekk er en differensial flekk som skiller bakterier avhengig av cellevegginnholdet. I denne metoden reagerer bakteriecellene med et krystallfiolett fargestoff for å bli fiolett. Gjennom tilsetningen av et blekemiddel mister noen bakterieceller fargen, mens andre ikke gjør det. Gjennom tilsetning av safraninfargestoff blir misfargede celler røde, mens bakterieceller som ikke mister farge forblir fiolette. Celler som blir røde kalles gramnegative organismer og celler som ikke blir røde blir klassifisert som gram-positive organismer. Gram-fargeteknikken gir en rask metode for første identifisering av bakterier involvert i infeksjoner. På samme måte hjelper den syreresistente fargeprosessen til å spesifikt identifisere organismer som tilhører klassen av bakterier som kalles mykobakterier, som Mycobacterium tuberculosis.
Mulighet deteksjon
I prøver av bakteriekulturer er det ofte viktig å oppdage tilstedeværelsen av levende bakterieceller. Metoder som fluorescerende farging hjelper til med å identifisere om dyrkende celler er levedyktige eller ikke. Levende bakterier har muligheten til å omdanne tetrazolium 5-cyano-2,3-ditolylklorid (CTC) til et fargestoff som viser rød fluorescens. Derfor, når CTC-fargede kulturer avgir disse fluorescensene, indikerer det tilstedeværelsen av levedyktige bakterier. Propidiumjodid er en flekk som bare virker på ikke-levende celler som har skadede membraner, og er derfor nyttig for å identifisere døde bakterieceller.
Identifisering av mobilstrukturer
Farging gir en metode for klar visualisering av forskjellige cellestrukturer. For eksempel tillater Feulgen-fargemetoden identifikasjon av kjernen i bakterieceller, mens Albert-farging er nyttig for å visualisere metakromatiske granuler. På samme måte tillater sølvimpregneringsteknikken identifikasjon av spiroketer. Flagella er lette å observere når de farges med Ryus fargelegging. Malakittgrønn farging hjelper til med å identifisere bakteriesporer.
