Innhold

• Bedre visualisering
• Identifikasjon og klassifisering
• Feasibility detection
• Identifikasjon av cellulære strukturer

Mikrobiologer studerer egenskapene til mikroorganismer, som alger, bakterier, protozoer, sopp og virus, ved hjelp av et mikroskop. Selv om enkelte organismer, som protozoer og gjærceller, er enkle å se gjennom lysbilder, krever bakterielle celler farging. Forskere har utviklet en rekke metoder, for eksempel Gram-fargingsteknikken, syrefast farging og fluorescerende farging for å forbedre visualiseringen av bakterieceller og cellestrukturer. Ved å bruke slike fargemetoder er det mulig å identifisere strukturelle egenskaper som bidrar til å klassifisere bakteriene.

Fargeteknikken bidrar til å forbedre visualiseringen av bakteriene (Duncan Smith / Stockbyte / Getty Images)

Bedre visualisering

De bakterielle organismer er så små at de fleste av dem bare er synlige under et mikroskop med en forstørkningskraft på 1000 ganger. Enkel utvidelse gir imidlertid ikke tilstrekkelig grad av klarhet, så bakterier bør derfor farges før observasjon for å gi den klarhet som kreves for visualisering.

Identifikasjon og klassifisering

Fargingen av bakterier for å skille mellom typene bakterier er kjent som differensiell farging. Gramfarging er en differensialfarging som skiller bakterier som en funksjon av cellevegginnhold. I denne metoden reagerer bakteriecellene med et krystallfiolett fargestoff for å slå fiolett. Ved å legge til en misfargingsmiddel, mister noen bakterielle celler farge, mens andre ikke gjør det. Ved å tilsette safranin fargestoffer, oppnår misfargede celler rød farging, mens bakterielle celler som ikke taper farge forblir fiolette. Røde celler kalles gram-negative organismer, og de som ikke blir røde, klassifiseres som gram-positive organismer. Gramfargingsteknikken gir en rask metode for den første identifikasjonen av bakterier involvert i infeksjoner. På samme måte bidrar den syrebestandige fargeprosessen til å spesifikt identifisere organismer som tilhører klassen bakterier kalt mykobakterier, slik som Mycobacterium tuberculosis.

Feasibility detection

I bakteriekulturprøver er det ofte viktig å oppdage nærvær av levende bakterieceller. Metoder som fluorescerende farging bidrar til å identifisere om kulturcellene er levedyktige eller ikke. Levende bakterier har evnen til å omdanne tetrazoliumklorid-5-cyano-2,3-ditolyl (CTC) til et fargestoff som viser rød fluorescens. Derfor, når CTC-fargede kulturer avgir disse fluorescensene, indikerer dette nærværet av levedyktige bakterier. Propidiumjodid er en flekker som bare virker på ikke-levende celler som har skadede membraner, og er derfor nyttig for å identifisere døde bakterieceller.

Identifikasjon av cellulære strukturer

Coloring gir en klar visualiseringsmetode for ulike cellestrukturer. F.eks. Tillater Feulgen-fargemetoden å identifisere kjernen inne i bakteriecellene, mens Albert-farging er nyttig ved visualisering av metakromatiske granuler. På samme måte tillater sølvimpregneringsteknikken identifisering av spiroketter. Flagellaen er lett å se når de er farget med fargene til Ryu. Malakitt grønn farging bidrar til å identifisere bakterielle sporer.