Innhold
Studier med mikrobielle kulturer krever ofte identifisering av organismer som er tilstede i dem. Når en liten del av en kultur blir introdusert på agar som inneholder et næringsmedium, er det mulig å skille en masse bakterier i individuelle kolonidannende enheter. Hver av disse enhetene utvikler seg i diskrete kolonier, som viser egenskaper som hjelper til med å identifisere organismen.
Hensikt
Mikrobiologistudier krever studier av morfologien til bestemte organismer. I noen tilfeller må organismer som er tilstede i en blandet kultur skilles fra før de kan analyseres. Dermed er det viktig å isolere disse mikrobielle koloniene. Bakteriekulturer inneholder et stort antall celler i en enkelt dråpe. Såing ved utarmning på en agarplate fortynner dem, slik at en enkelt bakteriecelle blir avsatt i et bestemt område av platen. Flere av disse individuelle cellene er skilt med noen få millimeter i mellom. Hver av dem deler seg for å danne tusenvis av nye celler, noe som gir opphav til isolerte kolonier.
Prinsipp
Agarplaten gir et medium rikt på næringsstoffer som stimulerer vekst og multiplikasjon av mikroorganismer. Kloakksåing bruker metoden med kvadrantstriering, der hele platen er delt inn i fire kvadranter. Når du beveger deg fra en kvadrant til en annen, skjer det en gradvis fortynning av den opprinnelige kulturen over hele den tilgjengelige overflaten. Kvadranten du starter i viser tett og ukjent mikrobiell vekst, som ser ut som et teppe av mikroorganismer, mens den siste viser isolerte kolonier.
Materialer
Såing ved utmattelse krever næringsagarplater, en sløyfe for inokulering, bakteriekultur, en desinfiserende løsning, som Lysol 10%, og en Bunsen-brenner. Du trenger også sikkerhetsutstyr, som forkle, hansker og briller. Inokulatet for dannelse av strekkmerker er laget av bakteriekulturen ved hjelp av sløyfen og skraper næringsagarplatene. Bunsen-brenneren er for å flamme håndtaket under spor. Bruk desinfeksjonsløsningen til å rengjøre overflaten før du starter eksperimentet.
Metode
Bruk en liten mengde inokulum til å så i den første kvadranten med en frem og tilbake bevegelse. Flamme håndtaket og la det avkjøles, og berør det til en del av agarplaten som ikke er inokulert. Trykk på den til den ene enden av området du sådd, og strekk den derfra til den andre kvadranten. Flamme og avkjøl løkken igjen, og fra det andre området, arbeid den tredje kvadranten. Gjenta den samme prosessen med den fjerde kvadranten.
